視頻介紹
實(shí)驗(yàn)原理:
芽孢壁厚,透性低,著色、脫色困難,利用著色力強(qiáng)的染色劑在加熱條件下染色時(shí),染料同時(shí)進(jìn)入菌體和芽孢。進(jìn)入菌體的染料可經(jīng)水洗脫色,而進(jìn)入芽孢的染料則難以透出,若再用復(fù)染液染色后,芽孢仍然保留初染劑的顏色,而菌體被染成復(fù)染液的顏色,即菌體和芽孢分別被染成紅色和綠色來(lái)區(qū)分。
操作步驟:
1. 取一個(gè)載玻片,在其中央滴一滴去離子水,用接種環(huán)蘸取少量菌體于去離子水中,涂抹均勻,待干燥后,在火焰上過(guò)3次以固定;
2. 滴加3-4滴A液于已經(jīng)固定的涂片上;
3. 用鑷子夾住載玻片在火焰上持續(xù)加熱6-8s(可續(xù)加染液以防其蒸干);
4. 加熱完畢待玻片冷卻后,傾去染液,水洗至不再褪色為止;
5. 用B液復(fù)染1min,水洗至流出液無(wú)色。待玻片干燥后,轉(zhuǎn)移至顯微鏡油鏡下觀察。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
枯草芽孢桿菌的芽孢呈綠色,菌體呈紅色。
注意事項(xiàng):
1. 只有在加熱條件下芽孢滲透性發(fā)生變化,才能將其染色;
2. 第3步,持續(xù)加熱6-8s要使染液冒蒸汽但不能沸騰,并且不能蒸干。