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什么是明膠?
明膠為從骨膠原而來的一種蛋白質(zhì),可溶于熱水,形成的溶液凝固點(diǎn)在20-30℃,低溫時(shí)呈固態(tài)狀不流動(dòng),超過30℃時(shí)呈液體狀。某些細(xì)菌具有明膠酶,可將明膠水解為多肽、氨基酸后失去凝膠性質(zhì),低溫下不再凝固。
操作步驟:
可使用溫水、培養(yǎng)箱或用手捂熱等方法將明膠生化管溫?zé)嶂链蠹s30-40℃,培養(yǎng)基呈液體流動(dòng)狀,擺直立,打開生化管,可用接種針或接種環(huán)挑取待測(cè)菌落穿刺接種或加入50-100μL的約109CFU/mL的菌懸液,纏上封口膜,置于36℃或其他適宜的條件下進(jìn)行培養(yǎng)。
結(jié)果觀察:
將生化管放入冰箱冷藏中10-20min或采用其他方法將培養(yǎng)基冷卻至10℃左右,傾斜生化管,觀察培養(yǎng)基是否能凝固。若培養(yǎng)基凝固不流動(dòng),說明明膠未被分解液化,為陰性反應(yīng);若培養(yǎng)基不能凝固呈液體狀,說明明膠已被水解,為陽性反應(yīng)。
注意事項(xiàng):
(1)明膠在培養(yǎng)箱中和室溫較高時(shí)呈液態(tài)狀,因此觀察試驗(yàn)結(jié)果時(shí),必須確保培養(yǎng)基已完全冷卻。
(2)細(xì)菌液化明膠的時(shí)間存在差異,有些細(xì)菌可在18-24h液化,有些細(xì)菌需要3-7天甚至更長(zhǎng)時(shí)間才能液化,當(dāng)出現(xiàn)陰性結(jié)果時(shí),應(yīng)至少觀察一周。