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實(shí)驗(yàn)原理:
過(guò)氧化氫酶實(shí)驗(yàn)通常用于細(xì)菌的生化鑒定。某細(xì)菌(例如:金黃色葡萄球菌),可以產(chǎn)生過(guò)氧化氫酶,可將過(guò)氧化氫分解為為水和分子氧,從而產(chǎn)生大量氣泡。
操作步驟:
1. 用蒸餾水沖洗載玻片,用擦鏡紙擦干,置于玻璃平皿中。
2. 用一次性接種環(huán)或接種針從37度培養(yǎng)18-24h的金黃色葡萄球菌平板上挑取單個(gè)菌落,置于載玻片上,同樣挑取糞腸球菌單菌落置于載玻片上。
3. 取一支百分之三過(guò)氧化氫酶試劑瓶從藍(lán)點(diǎn)處向外掰開,用移液槍吸取,滴1-2滴于載玻片的菌落上。
4. 觀察現(xiàn)象,金黃色葡萄球菌有氣泡產(chǎn)生,為陽(yáng)性反應(yīng);糞腸球菌沒(méi)有氣泡產(chǎn)生,為陰性反應(yīng)。
5. 試驗(yàn)結(jié)束后,蓋上培養(yǎng)皿蓋進(jìn)行消毒滅菌處理。
注意事項(xiàng):
1. 此試驗(yàn)需用新鮮的菌,接種時(shí)需挑取大量菌體(接種環(huán)一滿環(huán)),若接種量太少可能會(huì)出現(xiàn)假陰性;
2. 不宜使用血瓊脂培養(yǎng)物,因?yàn)榧t血球含有過(guò)氧化氫酶,可能造成假陽(yáng)性;
3.不能使用含鐵金屬制成的接種環(huán)或接種針進(jìn)行實(shí)驗(yàn),因?yàn)槲⒘康蔫F污染會(huì)使結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性。