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實(shí)驗(yàn)操作:
1、向上用力掀開塑料瓶蓋。將新鮮的羊血瓊脂平板底面劃分為20個(gè)~25個(gè)小格。
2、抬起鋁塑環(huán),沿著鋁塑蓋上的刻痕,水平方向用力拉動(dòng)拉環(huán)。挑取純培養(yǎng)的單個(gè)可疑菌落刺種到血平板上,每格刺種一個(gè)菌落,并刺種陽性對(duì)照菌(單增李斯特氏菌、伊氏李斯特氏菌和斯氏李斯特氏菌)和陰性對(duì)照菌(英諾克李斯特氏菌),穿刺時(shí)盡量接近底部,但不要觸到底面,同時(shí)避免瓊脂破裂。
3、36 ℃?1 ℃培養(yǎng)24h~48h。
結(jié)果觀察:
培養(yǎng)結(jié)束后于明亮處觀察:?jiǎn)卧隼钏固厥暇尸F(xiàn)狹窄、清晰、明亮的溶血圈;斯氏李斯特氏菌在刺種點(diǎn)周圍產(chǎn)生弱的透明溶血圈;英諾克李斯特氏菌無溶血圈;伊氏李斯特氏菌產(chǎn)生寬的、輪廓清晰的β-溶血區(qū)域。
將待測(cè)菌的溶血現(xiàn)象與對(duì)照菌對(duì)比,再結(jié)合其他生化鑒定實(shí)驗(yàn)即可判斷待測(cè)菌是否為單增李斯特氏菌。